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氣相色譜儀-液相色譜儀廠家-南京科捷檢測科技發展有限公司

色譜柱的平衡常識

   在我們把柱子安裝到儀器中前,必須確認儀器中原有管路中的試劑跟色譜柱保存試劑是相容的。如果不相容,需要在接上柱子前先打開purge閥把儀器管路中的試劑過渡并切換成與色譜柱保存試劑相容的試劑。

 

   特別需要關注系統正反相切換的時候:對于反相色譜柱,可能會因為正反相不相容而使接下去的實驗出現不可估計的異?,F象;而對于正相硅膠柱,或者氧化鋁色譜柱,或者某些涂覆型手性柱,它們對水非常敏感,很可能會讓接下去的實驗中讓色譜峰嚴重變形,并且可能對色譜柱造成不可逆的損壞,所以在正反相的切換中需要切換完全。不管是正相切換到反相還是反相切換到正相,第一步都是把系統中原有的酸、堿、或者其他添加劑置換完全,然后過渡到乙醇/異丙醇或者其他過渡溶劑;最后置換成接下去所需使用的體系。

 

 即便都是在反相色譜中的切換,也需要過渡完全。通常,反相色譜柱會保存在純甲醇或者純乙腈當中,反相色譜流動相緩沖液中很多情況下會加入緩沖鹽,如果不經過置換,含鹽緩沖液與純有機相相遇,很容易產生鹽析。一旦產生鹽析,很可能損壞柱床。為了避免這種情況的發生,在過渡到所使用的帶緩沖鹽的流動相前,先使用1~3個柱體積的50%體積比的甲醇水過渡一下,然后再轉到緩沖鹽體系平衡即可。

 

 同理,因為正己烷只能跟甲醇/乙腈只能部分混溶,用于正相體系保存的正己烷過渡到反相,需要合適的溶劑過渡;而用水相緩沖液保存的離子交換柱的過渡,也需要合適的溶劑過渡.一般來說10~20柱體積的平衡就可讓色譜柱達到平衡狀態。當然,在使用了離子對或者胺類改性劑的體系中,平衡時間需要適當延長,以達到完全平衡的目的。



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